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使用葉綠素測定儀如何進行實驗

發布時間:2019-06-04瀏覽:333次

  葉綠素測定儀是用來測量葉綠素含量的儀器,葉綠素測定儀測量時間快速,LCD直接顯示葉綠素值,30個數據,自動計算並顯示平均值。
  實驗準備
  (一)材料:新鮮(或烘幹)的植物葉片。
  (二)儀器設備:1. 分光光度計;2. 電子頂載天平(感量0.01g);3. 研缽;4. 棕色容量瓶;5. 小漏鬥;6. 定量濾紙;7. 吸水紙;8. 擦境紙;9. 滴管。
  (三)試劑:96%乙醇(或80%丙酮);石英砂;碳酸鈣粉。
  實驗步驟
  1. 取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或幹材料,擦淨組織表麵汙物,剪碎(去掉中脈),混勻。
  2. 稱取剪碎的新鮮樣品0.2g,共3份,分別放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3ml95%乙醇,研成均漿,再加乙醇10ml,繼續研磨至組織變白。靜置3~5min。
  3. 取濾紙1張,置漏鬥中,用乙醇濕潤,沿玻棒把提取液倒入漏鬥中,過濾到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇衝洗研缽、研棒及殘渣數次,後連同殘渣一起倒入漏鬥中。
  4. 用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。後用乙醇定容至25ml,搖勻。
  5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內。以95%乙醇為空白,在波長665nm、649nm下測定吸光度。
  實驗結果計算
  將測定得到的吸光值代入下麵的式子:Ca=13.9665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665。據此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度(Ca、Cb:mg/L),二者之和為總葉綠素的濃度。後根據下式可進一步求出植物組織中葉綠素的含量:
  葉綠素的含量(mg/g)= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數]/樣品鮮重(或幹重)。

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